離子對試劑是由強(qiáng)親水離子形成，反作用于樣品分子的中性離子對。因此，可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對色譜法是把離子對試劑加入到含水流動相中，被分析的組分離子在流動相中與離子對試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。

一般情況下，在建立HPLC分離方法的時(shí)候，我們推薦由RPC開始，接著添加離子對試劑（僅當(dāng)有需要時(shí)）。舉個(gè)例子，當(dāng)我們已知某個(gè)峰是對應(yīng)一個(gè)酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)時(shí)，我們便能準(zhǔn)確地預(yù)測出添加的IPC試劑對溶質(zhì)保留的影響。因此，當(dāng)改變RPC的其他條件仍不能達(dá)到合適的分離度時(shí)，我們可以通過使用IPC試劑不斷改變酸性溶質(zhì)和堿性溶質(zhì)的保留行為從而改善他們的分離效果。

那么，IPC在什么時(shí)候或者應(yīng)用于什么物質(zhì)的分離會是比較合適的分離方法呢？在樣品出現(xiàn)以下特點(diǎn)時(shí)我們就可以考慮使用離子對試劑：

（1）在反相色譜柱上不保留或保留弱；

（2）化合物帶有強(qiáng)離子官能團(tuán)，如羧基、銨基、氨基等；

（3）化合物在反相體系流動相中有足夠的溶解度。

使用離子色譜法可令樣品的保留行為產(chǎn)生類似于改變流動相的pH的變化，但是離子對色譜法能更好的控制酸性溶質(zhì)或堿性溶質(zhì)的保留行為，而且無須使用ji端的流動相pH（如，pH＜2.5或pH＞8.0）。